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    一、多功能凈化柱+KRC光化學柱后衍生法

　　1 簡介

　　多功能凈化柱是由多種固相復(fù)合填料不僅包括大分子物質(zhì)，更重要的是含有多種活性親脂性(非極性)和帶電(極性)物質(zhì)，用來吸附各種酯類，葉黃素，化學物質(zhì)，碳水化合物和蛋白質(zhì)等干擾物。多功能凈化柱+KRC衍生法就是利用PRIBOLAB公司的Pribofast 226/260多功能凈化柱可以將Aflatoxins B1、B2、G1、G2很好的分離出來，然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系統(tǒng)可以有效的測定Aflatoxins B1、B2、G1、G2含量。

　　2 多功能凈化柱特點：

　　2.1 多功能凈化柱可以簡化樣品提取、凈化步驟，無需清洗和洗提。

　　2.2 可以實現(xiàn)多種毒素檢測，有效降低檢測成本;

　　2.3 HPLC+FLD+KRC衍生化，可以有效提高檢測靈敏度，實現(xiàn)較低的檢測限(Aflatoxins B1 0.05ppb);

　　2.4 光化學衍生操作簡便，無需使用衍生試劑(通常電化學柱后衍生均需要使用衍生試劑，分析成本高，操作麻煩，儀器故障率較高);

　　2.5 一步法凈化，回收率高達90%左右。

　　2.6 廣泛適用于各類農(nóng)產(chǎn)品：谷物、淀粉、動物飼料、食品、堅果、棉籽等。

　　3 多功能凈化柱/KRC衍生法操作步驟簡介：

　　3.1 提取樣品：研磨粉碎、稱重25g樣品;用乙腈/水(84/16 V/V)混合樣品，

　　高速均質(zhì) 1 分鐘。

　　3.2 過濾：將提取的樣品定量濾紙過濾，收集濾液;

　　3.3 取4-6ml濾液快速通過 多功能凈化柱PribofastM226 或Pribofast M260

　　3.4 收集過柱溶液，直接用于HPLC檢測，KRC衍生化后直接記錄Aflatoxins 濃度。

　　二、免疫親和柱+KRC光化學柱后衍生法

　　1 簡介

　　PribofastAflatoxins 總量免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的毒素，從而對毒素樣品起到非常針對性的純化作用，然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系統(tǒng)可以有效的測定Aflatoxins  B1、B2、G1、G2濃度，提高檢測的準確性和靈敏度。

　　2 免疫親和柱/KRC衍生法特點：

　　2.1 特異性很強使得樣品凈化效果;

　　2.2 使用免疫親和柱操作架可以使樣品凈化快速，提高檢測效率高

　　2.3 HPLC+FLD+KRC柱后衍生化，有效提高檢測靈敏度，實現(xiàn)較低的檢測限 (Aflatoxins B1 0.05ppb)。

　　2.4 衍生化操作方便，光化學衍生化無需使用衍生試劑(通常電化學柱后衍生均需要使用衍生試劑，分析成本高，操作麻煩，儀器故障率較高)。

　　2.5 回收率高，達到90%以上

　　3 免疫親和柱法操作步驟簡介：

　　3.1 提取樣品：研磨、稱重50g樣品;用甲醇/水(80/20 V/V)混合物將樣品

　　高速混勻 1 分鐘。

　　3.2 過濾：將提取的樣品濾膜過 玻璃纖維濾紙，

　　3.3 將回溫的免疫親和柱安裝在泵流操作架進行過柱凈化：經(jīng)過PribofastAflatoxins 總量免疫親和柱(IAC-010-3)活化、淋洗、洗脫三步驟，洗脫下來的溶液可直接用于HPLC檢測;

　　3.4 測定：HPLC直接進樣，經(jīng)色譜柱、KRC光化學柱后衍生化后直接記錄Aflatoxins 濃度;

　　三、酶聯(lián)免疫法檢測Aflatoxins 總量

　　1 采取直接競爭ELISA方法，利用酶標儀測定樣品和標準品的樣本的吸光值計算得到樣品中Aflatoxins 素總量的含量。

　　2 試劑盒檢測時間：15分鐘+15分鐘

　　3 檢測限：0.1ppb

　　關(guān)于Pribofast KRC 柱后衍生器和 HPLC參數(shù)

　　●Pribofast KRC 柱后光化學衍生器 波長：254 nm

　　●HPLC-色譜柱： Aflatoxins 色譜柱150 x 4.6 mm; C-18

　　●流動相: 甲醇/水 (45/ 55 v / v)

　　●流量：1.0 mL/min 柱溫： 30 °C

　　●進樣體積：20μL

　　●熒光檢測器：λ-激發(fā)波長：365 nm λ-發(fā)射波長：440 nm

　　●液相色譜儀需要配制：PriboLab公司Pribofast KRC 柱后光化學衍生器，含有1ml反應(yīng)池，納米燈管254nm

　　關(guān)于Aflatoxins 色譜柱：